蜘蛛俠（托比‧馬奎爾 Tobey Maguire 飾）在經曆了重重考驗之後，成為了人人敬仰的正義英雄，抱得美人歸。但是，光環下蜘蛛俠，也有自己的心病：他在第一集時放走了小偷導致最親愛的叔叔被小偷殺死，帕克一直耿耿於懷。 生活順意的帕克開始變得目中無人，當他再次抓到那個小偷時，殘忍地看著他從樓上摔下致死，過後才發現自己懲罰錯了人，真兇是「沙人」。當帕克將「沙人」殘忍殺死後，帕克心內的陰暗面漸漸在帕克的身體內佔據了上風，蜘蛛俠最終演變成邪惡的「毒蜘蛛」！糟糕的是，帕克沒有察覺到自身的變化，帕克最終如何擺脫自身的邪惡？